蜀(shu)科臺式(shi)低速離心機(ji)操作簡單(dan)、運行(xing)平衡、性能(neng)穩定、安(an)全可靠(kao)，廣泛(fan)應(ying)用(yong)(yong)于，放射(she)免(mian)疫、生(sheng)(sheng)物化學、食品(pin)衛生(sheng)(sheng)、環保等科(ke)研領域(yu)。今(jin)天來科(ke)普一下如何(he)用(yong)(yong)蜀科(ke)臺式低速離心機制備(bei)大腸桿菌感受態(tai)細胞，給各(ge)位實(shi)驗(yan)室的朋友(you)參考(kao)。
 

1.先將受體(ti)大(da)腸桿菌接種(zhong)于(yu)LB培養基中活化，置于(yu)恒溫培養箱中37℃培養過夜(ye)。。。

2.接著取一丁點（槍頭沾一下）上述大腸桿菌培養(yang)物菌落(luo)接種(zhong)于3-5毫升LB試管中，于恒溫振蕩器上，37℃振蕩培養(yang)過夜（約12-16 小時）。

4.再(zai)是(shi)用移液管無(wu)菌(jun)條件(jian)下(xia)，取過夜培養(yang)液1 毫(hao)升(sheng)，接種(zhong)于(yu)新(xin)鮮的LB 中（100毫(hao)升(sheng)LB/250毫(hao)升(sheng)三角瓶，接種(zhong)量按(an)菌(jun)液濃度而定，一(yi)般在1%左右），于(yu)恒溫(wen)振蕩(dang)器上37℃培養(yang)2―3 小時(shi)。

5.無菌(jun)條件下將上述1 毫(hao)升(sheng)菌(jun)液倒入1.5毫(hao)升(sheng)EP 管中（離心(xin)管應(ying)帶蓋并高(gao)壓滅菌(jun)過(guo)），每組(zu)2支。

6、帶菌(jun)液的離心(xin)(xin)(xin)管置于冰(bing)上10 分(fen)鐘，冷卻菌(jun)液，平(ping)衡好(hao)，置于蜀科臺式低速離心(xin)(xin)(xin)機上，3500r/min 離心(xin)(xin)(xin)5 分(fen)鐘。

7、無菌(jun)條件下(xia)，倒(dao)去上清LB，倒(dao)斜離心管(guan)，讓LB 流干(gan)，留下(xia)沉淀(dian)菌(jun)體，加入(ru)預冷的100mmol/L CaCl2溶液600微(wei)升，用微(wei)量取樣器輕(qing)輕(qing)吸沖底部沉淀(dian)菌(jun)體，使其懸浮(fu)后，把2支(zhi)管(guan)轉為1支(zhi)，搖勻后于(yu)冰(bing)浴中放(fang)置30分鐘。

8、重新將(jiang)CaCl2 菌懸浮(fu)液(ye)置于蜀科臺式低速離心機(ji)上，3500r/min離心10分鐘，小心側(ce)倒掉上清CaCl2 ，留沉淀菌體(ti)。

9、再把(ba)菌體懸浮在200 微升100mmol/L CaCl2 的溶液中，置(zhi)于冰上作為(wei)轉化(hua)的受體菌液。此(ci)制備的感(gan)受態細胞應在此(ci)步后1小時24小時內使用，效率(lv)比較高(gao)。

10.在事先制備好的含50μg/ml Amp的LB 平(ping)板表面加(jia)40ml X-gal 儲(chu)(chu)液和4μl IPTG儲(chu)(chu)液,用無菌玻棒將溶(rong)液涂勻,置于37℃下放置3-4小時,使(shi)培(pei)養基表面的液體*被吸收，備用。

  上面的應用對大家有幫助嗎？操作中的蜀科TD-5Z臺式低速離心機榮獲(huo)2016“國(guo)產(chan)好儀器”殊榮，是(shi)國(guo)內各大(da)實(shi)驗室(shi)、、生物科技、食(shi)品環保(bao)等單位*的儀器。如果您也(ye)有(you)需要，趕快(kuai)吧！