在細菌學診斷工作中,常需要從被檢材料中分離細菌,并獲得純培養。因此,通常要用到蜀科高速冷凍離心機對樣品進行離心分離,細菌的離心機分離培養技術是細菌學診斷中的一項重要基本操作。
分離細菌的方法很多(duo),常用的有(you)以下(xia)幾(ji)種:
將被檢材料接種于適宜培養基,再于固體培養基表面生長的菌落中,選樣欲分離菌的單個菌落,移種于另一適宜培養基中培養。因為一個菌落通常由一個細菌生長繁殖所形成,故培養出的細菌是單一的種類,即純培養。
或者用(yong)特殊的(de)培養環境(如厭氧、二氧化碳環境等)分(fen)離細菌。將被檢材料接種于易感動物體內,使病原菌在動物體內繁殖,然后從動物體內取材料利用蜀科高速冷凍離心機進行離心分離出需要的成分后培養。利用某些細菌對一些理化因素有特殊抵抗力,用理化方法處理接種材料,殺死其他微生物而保存需要的細菌,再分離培養。
一般情(qing)況下,被檢材料用前種方法分離培(pei)養即(ji)可(ke)。如材料污染嚴重,可(ke)先用后種方法處理,再用前種方法獲(huo)得純培(pei)養。
在分(fen)離培(pei)(pei)養操作中,嚴格遵守(shou)無菌(jun)操作。所有用具、培(pei)(pei)養基、試劑(ji)都要經過滅菌(jun),而且不能長(chang)時(shi)間暴露于空氣中。禁(jin)止用手(shou)接(jie)觸或用口吹已滅菌(jun)的(de)器(qi)皿(min)內部。
根據(ju)被檢材料中(zhong)可(ke)能存在的(de)病原苗(miao)的(de)特性,選擇(ze)適(shi)當的(de)培(pei)養基和培(pei)養條(tiao)件:(溫度、氣體環(huan)境等(deng))。進行未知菌的(de)初次分離,好多用幾種培(pei)養基,如(ru)肉湯、鮮(xian)血瓊脂、麥康克瓊脂等(deng),每種培(pei)養基接(jie)種數(shu)管,分別(bie)放在普通環(huan)境和厭氧(yang)環(huan)境中(zhong)培(pei)養。一般(ban)經過24—78小時(shi)觀察結果(guo),但也有(you)一些病原菌,需(xu)要培(pei)養校長(chang)時(shi)間才能生長(chang)。
被檢材料(liao)一般(ban)不需(xu)要處理,直接按種于培養(yang)基上。當懷疑(yi)為(wei)有芽腦的病(bing)原苗(miao)時,可(ke)將被檢材料(liao)加生(sheng)理鹽水磨碎,作(zuo)成1:10乳(ru)劑(液體材料(liao)不必稀釋),置60-80℃水浴中20—30分(fen)鐘,以殺死無(wu)芽胞的雜菌(jun),然(ran)后再接種于培養(yang)基中。
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