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高速離心機在質粒提取中的重要應用

更新時間:2018-05-07      點擊次數:4872

  質粒是基(ji)因工程(cheng)中(zhong)常用的運載(zai)體,擔負著將目的基(ji)因轉(zhuan)移到(dao)宿(su)主細(xi)胞中(zhong)的重要(yao)使命。高速離心(xin)機對從細(xi)菌中分離(li)質(zhi)粒有非常重要的作用(yong)。以下是一實(shi)驗室質(zhi)粒提取(qu)的步(bu)驟,使用(yong)蜀科TD-20高速離(li)心(xin)機進行操作:

 

1、將擴增好的菌液重懸,轉入1.5mL離心管中;
2、用質粒小量抽提試劑盒,按說明書要求提取質粒;
3、細菌高速離心1min,*去除上清;
4、加入250ulRB溶液,振蕩器充分懸浮細菌;
5、加入250ulLB溶液。立即上下顛倒10次,使細菌裂解,室溫,放置2min;
6、加入250ulNB溶液。立即上下顛倒10次,使之充分中和,室溫,放置2min;
7、室溫,15000rpm,蜀科
高速離心機(ji)離心15min;
8、將吸附柱放入收集管內,離心得到的上清轉移吸附柱,室溫,15000rpm,蜀科高速離心機離心30s; 
9、棄廢液,將吸附柱放入收集管,加入700uL WB溶液到吸附柱中,15000rpm,蜀科高速離心機離心30s;
10、重復上一操作;
11、將吸附柱放入干凈的1.5mL離心管中,加30-50uL預熱的Elution Buffer,室溫,放置2min,高速離心1min;
12、樣品進行電泳檢測:1%瓊脂糖凝膠電泳,上樣量為2uL,紫外燈下觀察,明亮的帶為超螺旋形式,可以在一定程度上表明提取質粒的純度。

  質粒提取是基因工程基礎的一步,
高速離(li)心機(ji)的(de)運用非常頻繁,蜀科(ke)高速(su)離心機全系采(cai)用轉(zhuan)頭識(shi)別(bie)技術,有效防止轉(zhuan)頭超速(su)運轉(zhuan),保護機器和人員安全,技術性能位居*,歡迎選購!

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